IHHNV

کیت تشخیصی بیماری IHHNV

(Infectious Hypodermal and Hematopoietic Necrosis Virus Detection and prevention For Shrimp Farming  (IHHNV nested

این بیماری از میگوهای پرورشی منطقه آسیا، اقیانوسیه وآمریکا گزارش گردیده است .در کشورهای آسیائی، بیماری از سنگاپور، فیلیپین، تایلند، مالزی و اندونزی گزارش شده است.

  • عامل بیماری

عامل بیماری پاروویروس بوده و ویروس عامل این بیماری کوچکترین ویروس شناخته شده درمیگوهای خانواده پنائیده است که توسط یک ویروس DNA  دار تک رشته ای ایجاد می شود و باعث مرگ و میر فراوان در L.styliostris و ایجاد RDS ( Runt deformity syndrom) در آن می شود.تحقیق های اخیر نشان می دهد که ارتباط نزدیکی بین IHHNV و سندرم عضله سفید در P.Vannami وجود دارد.نام دیگر بیماری به نام سندرم دگرشکلی کوتولگی (RDS) می باشد.

  • نشانی های کلینیکی

بیماری می تواند بدون هیچ علائمی بروز نماید. معمولا یکی از نشانه های این بیماری مرگ و میر بالا (90%) در مرحله جوانی و بلوغ می باشد. نشانی های کلینیکی این بیماری می تواند شامل کاهش رشد، رشد نامتعادل در میگوهای جوان و نابالغ که به صورت خمیدگی و بدشکل بودن بدن، رشد نامنظم و تغییر شکل کوتیکول می باشد. از جمله علائم بیماری لکه های سفید در پوسته کوتیکول، تظاهرات آبی رنگ در میگوهای بزرگ ببری سیاه( مونودون) و انحنای روستروم یا خرطوم به یک طرف بدن می باشد.

به عنوان یکی از مهترین بیماری های ویروسی میگو مطرح است که به دو طریق عمودی و افقی انتقال می یابد.

IHHNV در رشد P.monodon به طور معنی داری اثر نمی گذارد اما طبق نتایج بدست آمده در تداوم حیات آن اثر معنی داری دارد.

دکتر Kathy F.J در سال 2001 یک روش PCR را ارائه داده است که می تواند توالی IHHNV را از توالی های مشابه متمایز نماید و از نتایج مثبت کاذب که با استفاده از بعضی کیت های تجاری PCR ایجاد می گردد جلوگیری نماید.

نتایج بدست آمده از آزمایش PCR یک مرحله ای که بروی نمونه های P.monodon ارسال شده از آفریقا و استرالیا،که توسط کیت های IQ2000 انجام شد،نشان دادند که 5% از نتایج ، مثبت کاذب بودند. اما در میگوی Vannamei هیچ نتیجه مثبت کاذبی یافت نشد.

در آخر برای اطمینان از نتیجه تستی که برروی نمونه های P.monodon  ارسال شده از آفریقا و استرالیا انجام شد nested PCR را طراحی کردیم که نیاز مشتریانی را که به سطح بالاتری از حساسیت و دقت نیاز دارند برطرف نمائیم.

با این کیت جدید نه تنها از نتایج مثبت کاذب جلوگیری می شود بلکه حساسیت تشخیص نیز به 10 کپی در هر واکنش افزایش میابد.

htt

  • خصوصیات:

بسته بندی: 200 واکنش

حد تشخیص: 10کپی در هر واکنش

قابلیت کمی: تشخیص در 3 سطح عفونی

زمان مورد نیاز تشخیص: برای 40 نمونه، از نمونه گیری تا کسب نتیجه 5/3 تا 4 ساعت به طول می انجامد.

کنترل داخلی کیت: به منظور حذف نتایج منفی کاذب و جلوگیری از واکنش های اشتباه در حین انجام آزمایش

تعیین استاندارد مثبت: به منظور ردیابی حساسیت در تشخیص

خاصیت تطبیق با روش RT-PCT و مناسب جهت تشخیص های چند گانه ویروسی

  • نتیجه آزمایش در ژل آگارز

ردیف 1: استاندارد مثبت با 2000 کپی در هر واکنش

ردیف 2: استاندارد مثبت با 200 کپی در هر واکنش

ردیف 3: استاندارد مثبت با 20 کپی در هر واکنش

ردیف 4: نمونه ای از عفونت شدید بیماری IHHNV

ردیف 5: نمونه ای از عفونت متوسط بیماری IHHNV

ریف 6: نمونه ای از عفونت خیلی کم بیماری IHHNV

ردیف7: نمونه منفی

ردیف 8: کنترل منفی

ردیف M: مارکر وزن مولکولی 848bp,630 bp,333 bp

  • موارد استفاده:

برای نمونه های جدا شده از بافت های تازه، فریز شده و یا محافظت شده با اتانول در میگو، پایه چشمی مولدین، آبشش، پلوپود،پریوپود و ماهیچه مورد استفاده قرار می گیرد.

برای جدا سازی SPF  ، ارزیابی محیط کشت، افزایش دقت در تشخیص و قرنطینه سازی مورد استفاده قرار می گیرد.

Print Friendly, PDF & Email